1 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測組織、牛奶、奶粉等樣本中氯霉素(Chloramphenicol,CAP)。
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的氯霉素與金標抗體相結(jié)合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上氯霉素偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的氯霉素含量大于檢測限時檢測線不顯色(或顯色比對照線淺),結(jié)果為陽性;當(dāng)樣本溶液中氯霉素含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色(顯色與對照線一致或更深),結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標
2.1 試劑卡靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
對樣本的*終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測下限:
牛奶………………………0.6ppb
奶粉………………………2ppb
組織………………………0.2ppb
3 試劑盒組成
檢測卡……………………50個/盒
樣本復(fù)溶液……………………1瓶
說明書…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 試劑:乙酸乙酯
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用*性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
5.2 配液:無
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 牛奶
1)取5ml奶樣于15ml離心管中,4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘。
2)棄去上層脂肪,取中層澄清液體100ul加樣本復(fù)溶液500ul,用力震蕩1min,充分混勻后用于檢測。
稀釋倍數(shù):6 檢測下限:0.6ppb
5.3.2 奶粉
1)稱取1g奶粉于15ml離心管中,再加入50℃左右去離子水到5ml(還原牛奶),用力震蕩3min,4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘。
2)棄去上層脂肪,取中層澄清液體100ul加樣本復(fù)溶液300ul,用力震蕩1min,充分混勻后用于檢測。
稀釋倍數(shù):20 檢測下限:2ppb
5.3.3 組織
1)魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮、脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,取0.5g去脂肪組織樣本,加入到15ml離心管中。
2)向離心管中準確加入純凈水和乙酸乙酯各2mL,將瓶塞蓋緊密封,振蕩5分鐘,4000轉(zhuǎn)/分離心2分鐘。
3.取1ml上清液到玻璃試管中,吹干濾液,加0.5ml樣本復(fù)溶溶解管底固體,充分混勻后用于檢測。
稀釋倍數(shù):2 檢測下限:0.2ppb
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2滴(約80ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果,超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
7 結(jié)果判斷
陰性:在檢測窗內(nèi),對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)顯色與對照線一致或更深。
陽性:在檢測窗內(nèi),對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)不顯色或比對照線淺。
失效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
8 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。