1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。 2. 取所需用量包被微孔板條,設(shè)空白、陰性及陽性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。 3. 陰性、陽性對(duì)照孔分別加陰性、陽性對(duì)照血清100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl;空白對(duì)照孔不加。 4. 混勻,置37℃溫浴30分鐘。 5. 扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。 6. 每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃溫浴30分鐘。 7. 洗滌,同步驟5。 8. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。 9. 每孔加終止液50μl,混勻,選擇酶標(biāo)儀測定波長450nm,用空白孔調(diào)零,測定各孔A值;也可選用630nm作為參考波長,用雙波長測定。